,
,⒈ 目地： 創(chuàng)建浮游菌檢測的規(guī)范操作程序，用以標準職工的檢測實際操作。,⒉ 范疇：適用企業(yè)內(nèi)部生產(chǎn)制造清潔區(qū)域內(nèi)的浮游菌檢測工作中,⒊ 義務(wù)：生產(chǎn)技術(shù)部、生產(chǎn)線、品質(zhì)服務(wù)部、QC檢測室主任、檢查員對本規(guī)程的實行承擔。,⒋ 檢測根據(jù)：GB/T16293―1996（醫(yī)藥工業(yè)凈化室浮游菌的測試標準）。,
, ⒌ 內(nèi)容：,
,5.1 器材與原材料,
,5.1.1 浮游菌采樣器,5.1.2 真空泵手壓泵,5.1.3 細胞培養(yǎng)皿,5.1.4 一般骨頭湯培養(yǎng)液,5.1.5 恒溫培養(yǎng)箱,
,5.2 測試流程,5.2.1 檢測前，儀器設(shè)備、細胞培養(yǎng)皿表層務(wù)必嚴苛消毒殺菌。,5.2.1.1 采試品在進到被測前首先用消毒房間的消毒液殺菌，用以100級凈化室的采樣器宜一直放到被 測屋子里。,5.2.1.2 用消毒液擦干凈細胞培養(yǎng)皿的外表層。,5.2.1.3 取樣前，先用消毒液消毒殺菌采樣器的機蓋、輪盤及其外罩的內(nèi)外邊，取樣完畢，于用消毒液輕輕地噴涌外罩的內(nèi)腔和輪盤。,5.2.1.4 取樣口及取樣管，應(yīng)用前務(wù)必高溫滅菌。如用消毒液對取樣管的及表面及內(nèi)腔開展消毒殺菌時，應(yīng)將管內(nèi)的殘余液扔掉并晾曬。,5.2.1.5 取樣者應(yīng)配戴與被測清潔地區(qū)相對應(yīng)的工作服裝，在輪盤上放進或替換細胞培養(yǎng)皿前，兩手用消毒液消毒殺菌。,5.2.2 取樣程序流程,5.2.2.1 儀器設(shè)備經(jīng)消毒殺菌后先不放進細胞培養(yǎng)皿，啟動機械泵抽真空，使儀器設(shè)備中的殘留消毒液揮發(fā)，時間不少于五分鐘，并調(diào)準總流量、輪盤轉(zhuǎn)速比。,5.2.2.2 關(guān)掉機械泵，放進細胞培養(yǎng)皿，蓋上外蓋后調(diào)整采樣器間隙高寬比。,5.2.2.3 置取樣口于取樣點后，先后打開采樣器、機械泵、旋轉(zhuǎn)計時器，依據(jù)取樣量設(shè)置取樣時間。,5.2.3 塑造,所有取樣完畢后，將細胞培養(yǎng)皿倒放置恒溫培養(yǎng)箱中塑造。,在30～35℃恒溫箱中塑造，時間不少于兩天。,每次培養(yǎng)液應(yīng)該有對比實驗，檢測培養(yǎng)液自身是不是環(huán)境污染。可每次選中3只細胞培養(yǎng)皿作對比塑造。,5.2.4 菌落計數(shù),5.2.4.1 用人眼立即記數(shù)、標識或在菌落計數(shù)器上點計，隨后用5～10倍高倍放大鏡查驗，看是不是有忽略。,5.2.4.2 若平板電腦上面有兩個或兩個之上的菌體重合，可辨別時仍以兩個或兩個之上菌落計數(shù)。,
,5.3 常見問題,5.3.1 采樣器的取樣口務(wù)必用以便消毒殺菌及有機化學特性平穩(wěn)的原材料生產(chǎn)制造。,5.3.2 取樣管禁止漏水，內(nèi)腔應(yīng)光潔。,5.3.3 取樣管的長短應(yīng)依據(jù)測量點的高寬比定，盡量避免彎折。,5.3.4 應(yīng)用前要認真仔細每一個細胞培養(yǎng)皿的品質(zhì)，培養(yǎng)液及細胞培養(yǎng)皿有霉變、損壞或環(huán)境污染的不可以應(yīng)用。,5.3.5 實際操作時要避免取樣管的環(huán)境污染和別人為對樣版的環(huán)境污染。,5.3.6 對培養(yǎng)液、塑造標準以及他主要參數(shù)作詳盡的紀錄。,5.3.7 因為病菌各種多種多樣，區(qū)別甚大，記數(shù)時一般用散射光于細胞培養(yǎng)皿反面或下邊認真觀察，不必漏計細胞培養(yǎng)皿邊沿生長發(fā)育的菌體，并須留意細菌菌落或培養(yǎng)液沉淀的差別，必需時要光學顯微鏡辨別。,
,5.4 檢測標準,5.4.1 測試狀態(tài),5.4.1.1  浮游菌檢測前，被檢測凈化室 （區(qū)）溫、環(huán)境濕度須做到要求的規(guī)定，負壓差、 換風、氣體壓力務(wù)必操縱在標準值內(nèi)。,5.4.1.2 浮游菌檢測前，被 檢測凈化室（區(qū)）早已過消毒殺菌。,5.4.1.3 測試狀態(tài)有靜態(tài)數(shù)據(jù)和動態(tài)性 二種，測試狀態(tài)的挑選務(wù)必合乎生產(chǎn)制造的規(guī)定，并在匯報中標明測試狀態(tài)。,5.4.2 測試工程師,5.4.2.1 測試工程師務(wù)必配戴合乎自然環(huán)境等級的工作服裝。,5.4.2.2 靜態(tài)數(shù)據(jù)檢測時，房間內(nèi)測試工程師不可超過兩人。,5.4.3 檢測時間,5.4.3.1 對單邊流，如100級凈化處理屋子及層.流操作臺，檢測應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運作不少于十分鐘后逐漸。,5.4.3.2 對非單邊流，如10000級，以及之上的凈化處理屋子，檢測應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運作不少于三十分鐘后逐漸。,5.4.4 浮游菌濃度計算,5.4.4.1 取樣點總數(shù)以及布局,5.4.4.1.1 至少取樣點數(shù)量：浮游菌檢測的至少取樣點數(shù)量分成日常檢測及自然環(huán)境認證二種狀況，詳細情況見下表。,
, 至少取樣點數(shù)量,5.4.4.1.2  取樣點的部位,5.4.4.1.2.1 對每一個100級清潔實際操作地區(qū)（如層流罩、層.流操作臺），可在離藥品敞開式出口處三十厘米處設(shè)測量點。,5.4.4.1.2.2 對每一個10000級清潔工作中地區(qū)（如藥品張口工作區(qū)域）可在工作臺面處設(shè)測量點。,5.4.4.1.2.3  正壓送風口測量點部位離去排風面三十厘米上下。,5.4.4.1.2.4 可在主要設(shè)備或重要工作中主題活動范疇處提升測量點。,5.4.4.2 最少取樣量,取樣量依據(jù)日常檢測及自然環(huán)境認證定，每一次最少取樣量見下表。, 最少取樣量,5.4.4.3 取樣頻次：每一個取樣點一般取樣一次。,5.4.5 取樣常見問題,5.4.5.1 針對單邊流功正壓送風口，采樣器取樣支管房屋朝向應(yīng)正對著氣旋方位；針對非單邊流，取樣支管往上。,5.4.5.2 布局取樣點時，最少應(yīng)離去細顆粒物較集中化的送風口1米之上。,5.4.5.3 取樣時，測試工程師應(yīng)立在取樣口的低處側(cè)。,
,5.5  紀錄：對檢測狀況開展紀錄（屋子溫度、空氣濕度、壓力差及測試狀態(tài)等）。,
,5.6  結(jié)果測算,用記數(shù)方式 得到每個細胞培養(yǎng)皿的菌體數(shù)。,每一個測量點的浮游菌均值濃度值的測算見上式。,                        菌體數(shù),均值濃度值（個ㄍm3）= ―――――,                        取樣量,
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凈化室浮游菌檢測規(guī)范安全操作規(guī)程

文件夾名稱：凈化室浮游菌檢測規(guī)范安全操作規(guī)程							文件編號：ZL/SOP/ZK/02300
制訂人：				日期：     年  月  日			文件屬性：工作要求
審批人：				日期：     年  月  日			版   次：第一版
準許人：				日期：     年  月  日			印   數(shù)：共5份
起效日期：                          年  月  日							授予單位：綜合辦公室
派發(fā)至： 品質(zhì)總經(jīng)理、品質(zhì)服務(wù)部、QC檢測實驗室、綜合辦公室
變動記述	修定號	修定人	準許日期		起效日期	原 因 及 目 的

⒈ 目地：創(chuàng)建浮游菌檢測的規(guī)范操作程序，用以標準職工的檢測實際操作。

⒉ 范疇：適用企業(yè)內(nèi)部生產(chǎn)制造清潔區(qū)域內(nèi)的浮游菌檢測工作中

⒊ 義務(wù)：生產(chǎn)技術(shù)部、生產(chǎn)線、品質(zhì)服務(wù)部、QC檢測室主任、檢查員對本規(guī)程的實行承擔。

⒋ 檢測根據(jù)：GB/T16293―1996（醫(yī)藥工業(yè)凈化室浮游菌的測試標準）。

⒌ 內(nèi)容：

5.1 器材與原材料

5.1.1 浮游菌采樣器

5.1.2 真空泵手壓泵

5.1.3 細胞培養(yǎng)皿

5.1.4 一般骨頭湯培養(yǎng)液

5.1.5 恒溫培養(yǎng)箱

5.2 測試流程

5.2.1 檢測前，儀器設(shè)備、細胞培養(yǎng)皿表層務(wù)必嚴苛消毒殺菌。

5.2.1.1 采試品在進到被測前首先用消毒房間的消毒液殺菌，用以100級凈化室的采樣器宜一直放到被 測屋子里。

5.2.1.2 用消毒液擦干凈細胞培養(yǎng)皿的外表層。

5.2.1.3 取樣前，先用消毒液消毒殺菌采樣器的機蓋、輪盤及其外罩的內(nèi)外邊，取樣完畢，于用消毒液輕輕地噴涌外罩的內(nèi)腔和輪盤。

5.2.1.4 取樣口及取樣管，應(yīng)用前務(wù)必高溫滅菌。如用消毒液對取樣管的及表面及內(nèi)腔開展消毒殺菌時，應(yīng)將管內(nèi)的殘余液扔掉并晾曬。

5.2.1.5 取樣者應(yīng)配戴與被測清潔地區(qū)相對應(yīng)的工作服裝，在輪盤上放進或替換細胞培養(yǎng)皿前，兩手用消毒液消毒殺菌。

5.2.2 取樣程序流程

5.2.2.1 儀器設(shè)備經(jīng)消毒殺菌后先不放進細胞培養(yǎng)皿，啟動機械泵抽真空，使儀器設(shè)備中的殘留消毒液揮發(fā)，時間不少于五分鐘，并調(diào)準總流量、輪盤轉(zhuǎn)速比。

5.2.2.2 關(guān)掉機械泵，放進細胞培養(yǎng)皿，蓋上外蓋后調(diào)整采樣器間隙高寬比。

5.2.2.3 置取樣口于取樣點后，先后打開采樣器、機械泵、旋轉(zhuǎn)計時器，依據(jù)取樣量設(shè)置取樣時間。

5.2.3 塑造

所有取樣完畢后，將細胞培養(yǎng)皿倒放置恒溫培養(yǎng)箱中塑造。

在30～35℃恒溫箱中塑造，時間不少于兩天。

每次培養(yǎng)液應(yīng)該有對比實驗，檢測培養(yǎng)液自身是不是環(huán)境污染。可每次選中3只細胞培養(yǎng)皿作對比塑造。

5.2.4 菌落計數(shù)

5.2.4.1 用人眼立即記數(shù)、標識或在菌落計數(shù)器上點計，隨后用5～10倍高倍放大鏡查驗，看是不是有忽略。

5.2.4.2 若平板電腦上面有兩個或兩個之上的菌體重合，可辨別時仍以兩個或兩個之上菌落計數(shù)。

5.3 常見問題

5.3.1 采樣器的取樣口務(wù)必用以便消毒殺菌及有機化學特性平穩(wěn)的原材料生產(chǎn)制造。

5.3.2 取樣管禁止漏水，內(nèi)腔應(yīng)光潔。

5.3.3 取樣管的長短應(yīng)依據(jù)測量點的高寬比定，盡量避免彎折。

5.3.4 應(yīng)用前要認真仔細每一個細胞培養(yǎng)皿的品質(zhì)，培養(yǎng)液及細胞培養(yǎng)皿有霉變、損壞或環(huán)境污染的不可以應(yīng)用。

5.3.5 實際操作時要避免取樣管的環(huán)境污染和別人為對樣版的環(huán)境污染。

5.3.6 對培養(yǎng)液、塑造標準以及他主要參數(shù)作詳盡的紀錄。

5.3.7 因為病菌各種多種多樣，區(qū)別甚大，記數(shù)時一般用散射光于細胞培養(yǎng)皿反面或下邊認真觀察，不必漏計細胞培養(yǎng)皿邊沿生長發(fā)育的菌體，并須留意細菌菌落或培養(yǎng)液沉淀的差別，必需時要光學顯微鏡辨別。

5.4 檢測標準

5.4.1 測試狀態(tài)

5.4.1.1  浮游菌檢測前，被檢測凈化室 （區(qū)）溫、環(huán)境濕度須做到要求的規(guī)定，負壓差、換風、氣體壓力務(wù)必操縱在標準值內(nèi)。

5.4.1.2 浮游菌檢測前，被 檢測凈化室（區(qū)）早已過消毒殺菌。

5.4.1.3 測試狀態(tài)有靜態(tài)數(shù)據(jù)和動態(tài)性 二種，測試狀態(tài)的挑選務(wù)必合乎生產(chǎn)制造的規(guī)定，并在匯報中標明測試狀態(tài)。

5.4.2 測試工程師

5.4.2.1 測試工程師務(wù)必配戴合乎自然環(huán)境等級的工作服裝。

5.4.2.2 靜態(tài)數(shù)據(jù)檢測時，房間內(nèi)測試工程師不可超過兩人。

5.4.3 檢測時間

5.4.3.1 對單邊流，如100級凈化處理屋子及層.流操作臺，檢測應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運作不少于十分鐘后逐漸。

5.4.3.2 對非單邊流，如10000級，以及之上的凈化處理屋子，檢測應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運作不少于三十分鐘后逐漸。

5.4.4 浮游菌濃度計算

5.4.4.1 取樣點總數(shù)以及布局

5.4.4.1.1 至少取樣點數(shù)量：浮游菌檢測的至少取樣點數(shù)量分成日常檢測及自然環(huán)境認證二種狀況，詳細情況見下表。

至少取樣點數(shù)量

總面積	清潔等級
	100		10000		100000
	認證	檢測	認證	檢測	認證	檢測
<10	2～3	1	2	1	2	――
≥10＜20	4	2	2	1	2	――
≥20＜40	8	3	2	1	2	――
≥40＜100	16	4	4	1	2	――
≥100＜200	40	――	10	――	3	――
≥200＜400	80	――	20	――	6	――
400	160	――	40	――	13	――
注：（1）表格中的總面積，針對100級的單邊流凈化室（包含層.流操作臺），指的是正壓送風口表面積；針對10000級、100000非單向流潔凈室，指的是屋子總面積。   （2）日常檢測的取樣點數(shù)量由生產(chǎn)工藝流程的重要實際操作點來明確。

5.4.4.1.2  取樣點的部位

5.4.4.1.2.1 對每一個100級清潔實際操作地區(qū)（如層流罩、層.流操作臺），可在離藥品敞開式出口處三十厘米處設(shè)測量點。

5.4.4.1.2.2 對每一個10000級清潔工作中地區(qū)（如藥品張口工作區(qū)域）可在工作臺面處設(shè)測量點。

5.4.4.1.2.3  正壓送風口測量點部位離去排風面三十厘米上下。

5.4.4.1.2.4 可在主要設(shè)備或重要工作中主題活動范疇處提升測量點。

5.4.4.2 最少取樣量

取樣量依據(jù)日常檢驗及自然環(huán)境認證定，每一次最少取樣量見下表。

最少取樣量

潔凈度等級等級	取樣量，Lㄍ次
	日常檢測	自然環(huán)境認證
100級	600	1000
10000級	400	500
100000級	50	100

5.4.4.3 取樣頻次：每一個取樣點一般取樣一次。

5.4.5 取樣常見問題

5.4.5.1 針對單向流功正壓送風口，采樣器取樣支管房屋朝向應(yīng)正對著氣旋方位；針對非單向流，取樣支管往上。

5.4.5.2 布局取樣點時，最少應(yīng)離去細顆粒物較集中化的送風口1米之上。

5.4.5.3 取樣時，測試工程師應(yīng)立在取樣口的低處側(cè)。

5.5  紀錄：對檢測狀況開展紀錄（屋子溫度、空氣濕度、壓力差及測試狀態(tài)等）。

5.6  結(jié)果測算

用記數(shù)方式 得到每個細胞培養(yǎng)皿的菌體數(shù)。

每一個測量點的落菌均值濃度值的測算見上式。

                        菌體數(shù)

均值濃度值（個ㄍm3）= ―――――

                        取樣量