1  目地,建立一個(gè)凈化車間清潔區(qū)（室）沉降菌檢驗(yàn)的限度操作流程，確保清潔區(qū)微生物檢驗(yàn)按標(biāo)準(zhǔn)實(shí)行。, 2  局限性,企業(yè)全部清潔區(qū)（室）的沉降菌測量和自然環(huán)境的認(rèn)證。, 3  責(zé)任人,品質(zhì)技藝部對本SOP實(shí)行用心。, 4  程序流程,4.1  本檢測方法接受地基沉降法，即根據(jù)當(dāng)然地基沉降基本原理互聯(lián)網(wǎng)在空氣中的微生物顆粒于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)多個(gè)時(shí)間，在適宜的標(biāo)準(zhǔn)下讓其滋長到由此可見的菌體舉辦記數(shù)，以平板電腦培養(yǎng)皿中的菌體數(shù)來分辨清理自然環(huán)境內(nèi)的活微生物菌種數(shù)，并為此來鑒定清潔區(qū)（室）的 潔凈度。,4.2  常用的儀器設(shè)備和武器裝備,4.2.1  髙壓滅菌設(shè)備,應(yīng)用時(shí)要嚴(yán)苛憑據(jù)“髙壓滅菌設(shè)備安全操作規(guī)程”和使用說明實(shí)際操作。,4.2.2  控溫培養(yǎng)箱,務(wù)必按時(shí)對培養(yǎng)箱的溫度表舉辦計(jì)量檢定。,4.2.3  培養(yǎng)皿,接受Φ90mm×15mm的硼氯化鎂夾層玻璃培養(yǎng)皿。,4.2.4  培養(yǎng)基,4.2.4.1  簡單骨頭湯瓊脂培養(yǎng)基或別的中國藥典認(rèn)同的培養(yǎng)基。,4.2.4.2  培養(yǎng)基的提前準(zhǔn)備及殺菌,4.2.4.2.1  將Φ90mm的培養(yǎng)皿放置121℃濕熱滅菌20min或180℃干熱滅菌1h。,4.2.4.2.2 將培養(yǎng)基加溫融化，冷至45℃時(shí)，在無菌操作原則規(guī)定下將培養(yǎng)基引入培養(yǎng)皿，每皿約15ml。,4.2.4.2.3  等瓊脂凝結(jié)后，將培養(yǎng)基平皿倒放置30℃-35℃控溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),48h，若培養(yǎng)基平皿上確實(shí)沒有菌體生長發(fā)育，就可以供取樣用。制取好的培養(yǎng)基平皿宜在2℃-8℃的自然環(huán)境中儲放。,4.3  測試流程,4.3.1  取樣方法,將已制取好的培養(yǎng)皿按5.4.1.2的規(guī)定置放，開啟培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基外邊外露0.5h，再將培養(yǎng)皿蓋上之后顛倒。,4.3.2  培養(yǎng),4.3.2.1  全部取樣竣事后，將培養(yǎng)皿倒放置控溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。,4.3.2.2  在36℃±1培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于48h。,4.3.2.3  每次培養(yǎng)基應(yīng)該有對比實(shí)驗(yàn)，磨煉培養(yǎng)基自身是不是環(huán)境污染。可每次選中3只培養(yǎng)皿作對比培養(yǎng)。,4.3.3  菌落計(jì)數(shù),4.3.3.1  用人眼立即記數(shù)，標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，隨后用5-10倍高倍放大鏡查驗(yàn)，有無忽略。,4.3.3.2  若培養(yǎng)皿上面有兩個(gè)或兩個(gè)之上的菌體重合，可辨別時(shí)仍以兩個(gè)或兩個(gè)之上菌落計(jì)數(shù)。,
, 5 重視事宜,5.1  檢測用品要作殺菌處理，以保證 檢測的穩(wěn)定性、精確性。,5.2  接受一切對策避免人為因素對樣版的環(huán)境污染。,5.3  對培養(yǎng)基、培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)以及他主要參數(shù)作詳盡的記錄。,5.4  因?yàn)榧?xì)菌種類多種多樣，差別甚大，記數(shù)時(shí)一樣平常用散射光于培養(yǎng)皿之后或正臉細(xì)心調(diào)查，不必漏計(jì)培養(yǎng)皿邊沿生長發(fā)育的菌體，并須重視細(xì)菌菌落與培養(yǎng)基沉淀的差別，必須時(shí)要光學(xué)顯微鏡辨別。,5.5  取樣前要認(rèn)真仔細(xì)每一個(gè)培養(yǎng)皿的品質(zhì)，如發(fā)覺霉變、損壞或環(huán)境污染的應(yīng)去除。,
, 6  檢測標(biāo)準(zhǔn),6.1  測試狀態(tài),6.1.1  沉降菌檢測前，被檢測清潔區(qū)（室）的溫度濕度須抵達(dá)劃分的規(guī)定，負(fù)壓差、 換風(fēng)、氣體壓力務(wù)必操縱在劃分值內(nèi)。,6.1.2  沉降菌檢測前，被檢測清潔區(qū)（室）早已由消毒殺菌。,6.1.3  測試狀態(tài)有靜態(tài)數(shù)據(jù)和動態(tài)性二種，測試狀態(tài)的挑選務(wù)必相符合生產(chǎn)制造的規(guī)定，并在敘述中標(biāo)明測試狀態(tài)。,6.2  檢測員工,6.2.1  檢測人同務(wù)必衣著相符合自然環(huán)境潔凈度級其他事兒服。,6.2.2  靜態(tài)數(shù)據(jù)檢測時(shí)，房間內(nèi)檢測員工不可超過二人。,6.3  檢測時(shí)間,6.3.1  對單邊流，如100級凈化處理屋子及層.流事兒臺，檢測應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運(yùn)作不少于10min后最開始。,6.3.2  對非單邊流，如10000級、100000級之上的凈化處理屋子，檢測應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運(yùn)作不少于30min后最開始。,6.4  沉降菌記數(shù),6.4.1  取樣點(diǎn)數(shù)量以及布署,6.4.1.1  至少取樣點(diǎn)數(shù)量,地基沉降法的至少取樣等級可按表1明確。,
, ,
6.4.1.2  取樣點(diǎn)的布署,6.4.1.2.1  事兒區(qū)取樣點(diǎn)的部位距地0.8米~1.5m上下(稍高于事人情世故)。,6.4.1.2.2  可在重要武器裝備或重要事兒流動性局限性處增加取樣點(diǎn)。,6.4.1.2.3  取樣點(diǎn)部位的詳盡標(biāo)準(zhǔn)見圖下。,6.5  記錄,檢測敘述中應(yīng)記錄屋子溫度、空氣濕度、壓力差及測試狀態(tài)。,檢測敘述的撰寫見附注。,6.6  實(shí)際效果,6.6.1  用記數(shù)方法得到每個(gè)培養(yǎng)皿的菌體數(shù)。,6.6.2均值菌體數(shù)的籌算，見上式。, ,式中：M為均值菌體數(shù),M1為2號培養(yǎng)皿菌體數(shù),M2為2號培養(yǎng)皿菌體數(shù),Mn為n號培養(yǎng)皿菌體數(shù),n為培養(yǎng)皿數(shù)量。,
,6.7  實(shí)際效果鑒定,用均值菌體數(shù)分辨清潔區(qū)（室）空氣中的微生物菌種。100,000級清潔區(qū)沉降菌(個(gè)／m2)應(yīng)低于就是l0個(gè)；10000級清潔區(qū)沉降菌(個(gè)／m2)應(yīng)低于就是3個(gè)；100級清潔區(qū)沉降菌(個(gè)／m2)應(yīng)低于就是一個(gè)。,
,6.7.1  清潔區(qū)(室)內(nèi)的均值菌體數(shù)務(wù)必小于所選中的鑒定限度。,
,6.7.2  若某清潔區(qū)（區(qū)）內(nèi)的均值菌體數(shù)超越鑒定限度，則務(wù)必對于此事地區(qū)先舉辦消毒殺菌，隨后再次取樣2次，檢測實(shí)際效果均須合格。,
, 沉降菌檢測記錄,   , , , , 1  目地,

凈化車間沉降菌檢測安全操作規(guī)程

1  目地

建立一個(gè)凈化車間清潔區(qū)（室）沉降菌檢驗(yàn)的限度操作流程，確保清潔區(qū)微生物檢驗(yàn)按標(biāo)準(zhǔn)實(shí)行。

2  局限性

企業(yè)全部清潔區(qū)（室）的沉降菌測量和自然環(huán)境的認(rèn)證。

3  責(zé)任人

品質(zhì)技藝部對本SOP實(shí)行用心。

4  程序流程

4.1  本檢測方法接受地基沉降法，即根據(jù)當(dāng)然地基沉降基本原理互聯(lián)網(wǎng)在空氣中的微生物顆粒于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)多個(gè)時(shí)間，在適宜的標(biāo)準(zhǔn)下讓其滋長到由此可見的菌體舉辦記數(shù)，以平板電腦培養(yǎng)皿中的菌體數(shù)來分辨清理自然環(huán)境內(nèi)的活微生物菌種數(shù)，并為此來鑒定清潔區(qū)（室）的潔凈度。

4.2  常用的儀器設(shè)備和武器裝備

4.2.1  髙壓滅菌設(shè)備

應(yīng)用時(shí)要嚴(yán)苛憑據(jù)“髙壓滅菌設(shè)備安全操作規(guī)程”和使用說明實(shí)際操作。

4.2.2  控溫培養(yǎng)箱

務(wù)必按時(shí)對培養(yǎng)箱的溫度表舉辦計(jì)量檢定。

4.2.3  培養(yǎng)皿

接受Φ90mm×15mm的硼氯化鎂夾層玻璃培養(yǎng)皿。

4.2.4  培養(yǎng)基

4.2.4.1  簡單骨頭湯瓊脂培養(yǎng)基或別的中國藥典認(rèn)同的培養(yǎng)基。

4.2.4.2  培養(yǎng)基的提前準(zhǔn)備及殺菌

4.2.4.2.1  將Φ90mm的培養(yǎng)皿放置121℃濕熱滅菌20min或180℃干熱滅菌1h。

4.2.4.2.2 將培養(yǎng)基加溫融化，冷至45℃時(shí)，在無菌操作原則規(guī)定下將培養(yǎng)基引入培養(yǎng)皿，每皿約15ml。

4.2.4.2.3  等瓊脂凝結(jié)后，將培養(yǎng)基平皿倒放置30℃-35℃控溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

48h，若培養(yǎng)基平皿上確實(shí)沒有菌體生長發(fā)育，就可以供取樣用。制取好的培養(yǎng)基平皿宜在2℃-8℃的自然環(huán)境中儲放。

4.3  測試流程

4.3.1  取樣方法

將已制取好的培養(yǎng)皿按5.4.1.2的規(guī)定置放，開啟培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基外邊外露0.5h，再將培養(yǎng)皿蓋上之后顛倒。

4.3.2  培養(yǎng)

4.3.2.1  全部取樣竣事后，將培養(yǎng)皿倒放置控溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4.3.2.2  在36℃±1培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于48h。

4.3.2.3  每次培養(yǎng)基應(yīng)該有對比實(shí)驗(yàn)，磨煉培養(yǎng)基自身是不是環(huán)境污染。可每次選中3只培養(yǎng)皿作對比培養(yǎng)。

4.3.3  菌落計(jì)數(shù)

4.3.3.1  用人眼立即記數(shù)，標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，隨后用5-10倍高倍放大鏡查驗(yàn)，有無忽略。

4.3.3.2  若培養(yǎng)皿上面有兩個(gè)或兩個(gè)之上的菌體重合，可辨別時(shí)仍以兩個(gè)或兩個(gè)之上菌落計(jì)數(shù)。

5 重視事宜

5.1  檢測用品要作殺菌處理，以保證 檢測的穩(wěn)定性、精確性。

5.2  接受一切對策避免人為因素對樣版的環(huán)境污染。

5.3  對培養(yǎng)基、培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)以及他主要參數(shù)作詳盡的記錄。

5.4  因?yàn)榧?xì)菌種類多種多樣，差別甚大，記數(shù)時(shí)一樣平常用散射光于培養(yǎng)皿之后或正臉細(xì)心調(diào)查，不必漏計(jì)培養(yǎng)皿邊沿生長發(fā)育的菌落，并須重視細(xì)菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必須時(shí)用光學(xué)顯微鏡判別。

5.5  取樣前要認(rèn)真仔細(xì)每一個(gè)培養(yǎng)皿的品質(zhì)，如發(fā)覺霉變、損壞或環(huán)境污染的應(yīng)去除。

6  檢測標(biāo)準(zhǔn)

6.1  測試狀態(tài)

6.1.1  沉降菌檢測前，被檢測清潔區(qū)（室）的溫度濕度須抵達(dá)劃分的規(guī)定，負(fù)壓差、換風(fēng)、氣體壓力務(wù)必操縱在劃分值內(nèi)。

6.1.2  沉降菌檢測前，被檢測清潔區(qū)（室）早已由消毒殺菌。

6.1.3  測試狀態(tài)有靜態(tài)數(shù)據(jù)和動態(tài)性二種，測試狀態(tài)的挑選務(wù)必相符合生產(chǎn)制造的規(guī)定，并在敘述中標(biāo)明測試狀態(tài)。

6.2  檢測員工

6.2.1  檢測人同務(wù)必衣著相符合自然環(huán)境潔凈度級其他事兒服。

6.2.2  靜態(tài)數(shù)據(jù)檢測時(shí)，房間內(nèi)檢測員工不可超過二人。

6.3  檢測時(shí)間

6.3.1  對單邊流，如100級凈化處理屋子及層.流事兒臺，檢測應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運(yùn)作不少于10min后最開始。

6.3.2  對非單邊流，如10000級、100000級之上的凈化處理屋子，檢測應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運(yùn)作不少于30min后最開始。

6.4  沉降菌記數(shù)

6.4.1  取樣點(diǎn)數(shù)量以及布署

6.4.1.1  至少取樣點(diǎn)數(shù)量

地基沉降法的至少取樣等級可按表1明確。

6.4.1.2  取樣點(diǎn)的布署

6.4.1.2.1  事兒區(qū)取樣點(diǎn)的部位距地0.8米~1.5m上下(稍高于事人情世故)。

6.4.1.2.2  可在重要武器裝備或重要事兒流動性局限性處增加取樣點(diǎn)。

6.4.1.2.3  取樣點(diǎn)部位的詳盡標(biāo)準(zhǔn)見圖下。

6.5  記錄

檢測敘述中應(yīng)記錄屋子溫度、空氣濕度、壓力差及測試狀態(tài)。

檢測敘述的撰寫見附注。

6.6  實(shí)際效果

6.6.1  用記數(shù)方法得到每個(gè)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。

6.6.2均值菌落數(shù)的籌算，見上式。

式中：M為均值菌落數(shù)

M1為2號培養(yǎng)皿菌落數(shù)

M2為2號培養(yǎng)皿菌落數(shù)

Mn為n號培養(yǎng)皿菌落數(shù)

n為培養(yǎng)皿數(shù)量。

6.7  實(shí)際效果鑒定

用均值菌落數(shù)分辨清潔區(qū)（室）空氣中的微生物菌種。100,000級清潔區(qū)沉降菌(個(gè)／m2)應(yīng)低于就是l0個(gè)；10000級清潔區(qū)沉降菌(個(gè)／m2)應(yīng)低于就是3個(gè)；100級清潔區(qū)沉降菌(個(gè)／m2)應(yīng)低于就是一個(gè)。

6.7.1  清潔區(qū)(室)內(nèi)的均值菌落數(shù)務(wù)必小于所選中的鑒定限度。

6.7.2  若某清潔區(qū)（區(qū)）內(nèi)的均值菌落數(shù)超越鑒定限度，則務(wù)必對于此事地區(qū)先舉辦消毒殺菌，隨后再次取樣2次，檢測實(shí)際效果均須合格。

沉降菌檢測記錄